Étant donné que les médicaments à base de protéines et de peptides sont pour la plupart des substances bioactives

Étant donné que les médicaments protéiques peptidiques sont pour la plupart des substances bioactives et que l’activité biologique dépend non seulement de la structure primaire du médicament, mais également étroitement liée aux structures secondaires et tertiaires, le test biologique est une méthode unique et nécessaire pour étudier la pharmacocinétique de cette classe. Les essais biologiques ont deux objectifs : déterminer directement les concentrations de médicaments dans les fluides corporels et identifier l'activité biologique des médicaments étiquetés. Ses méthodes peuvent être divisées en deux grandes catégories.
1.1.1 Analyse in vivo Méthode conventionnelle de glycémie de souris avec de l'insuline, etc., en plus de différentes méthodes établies en fonction de l'activité biologique de divers types de polypeptides protéiques, tels que les neutrophiles de mobilisation de l'IL-8 dans des expériences sur le lapin établies selon à la nature de l'IL-8 peut mobiliser un grand nombre de neutrophiles à partir des os [1]. Ce type de méthode reflète de manière plus intuitive l’activité biologique, mais implique l’animal dans son ensemble, prend du temps et est laborieux, a une faible sensibilité et présente de grandes variations.
1.1.2 L'analyse des tissus (cellules) in vivo telle que le NGF stimule la croissance des ganglions de la racine dorsale du poulet, l'ocytocine dans la méthode utérine ex vivo du rat, etc. Avec le développement de la biologie moléculaire, de nombreuses lignées cellulaires dépendantes spécifiques et sensibles ont été établies, et la culture cellulaire est devenue la méthode la plus courante. Selon les différents mécanismes d’interaction des protéines peptidiques avec les cellules, il existe de nombreuses opérations spécifiques. Tels que les tests de prolifération, rapides et sensibles, mais légèrement moins spécifiques ; En matière d'antiprolifération, le système de détection est toujours simple, sensible et spécifique ; Les tests de réduction de l'effet cytopathique [2], basés sur des médicaments ayant une activité antivirale tels que l'interféron, protègent les cellules des dommages viraux. La méthode est intuitive et sensible, mais peut être interférée par des sous-types peptidiques. Les méthodes ci-dessus sont basées sur l'augmentation et la diminution du nombre de cellules comme indicateurs quantitatifs et efficaces, et les méthodes de comptage comprennent la méthode de comptage direct et la méthode de comptage indirect, cette dernière comprenant la méthode MTT, la méthode d'incorporation d'isotopes (3H, 14C), etc. En outre, il existe des tests basés sur l'interaction indirecte des polypeptides du blanc d'œuf avec les cellules, tels que la méthode d'induction d'anticorps combinée à l'immunodétection [3], la méthode de décomposition induite par une enzyme combinée à une réaction enzymatique [4], etc. En général, les méthodes de culture cellulaire présentent les avantages de la sensibilité et de la spécificité, de l’objectivité et de la fiabilité, mais leurs inconvénients sont également évidents. Premièrement, les essais biologiques ne peuvent pas quantifier les petits métabolites inactifs et retracer leur dynamique in vivo ; Deuxièmement, les échantillons existent principalement dans du sérum humain ou animal, et l'interférence de substances endogènes dans le sérum et les réactions croisées d'éventuels facteurs endogènes affectent la spécificité de la méthode. De plus, des cytokines de seuil sont souvent nécessaires pour initier des processus biologiques, ce qui réduit la sensibilité de la méthode ; La culture à long terme de cellules souches dépendantes est sujette à des mutations qui affectent la spécificité du test.